高能熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源，經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍(lán)光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后，再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。這樣在強烈的對襯背景下，即使熒光很微弱也易辨認(rèn)，敏感性高，主要用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學(xué)成分等的研究。
鑒于發(fā)光水平較低，物鏡在顯微鏡中的作用至關(guān)重要，因為它是從樣品中收集光的物鏡功能。物鏡接受的光錐角度由物鏡的數(shù)值孔徑?jīng)Q定。在透射光熒光顯微鏡中，到達(dá)眼睛或其他探測器的光強度直接變化為物鏡和聚光器的數(shù)值孔徑的平方與總放大倍數(shù)的平方成反比。
高能熒光顯微鏡的規(guī)則是保持光學(xué)元件*沒有灰塵，污垢，油，溶劑和任何其他污染物，顯微鏡應(yīng)保存在低振動無煙室內(nèi)，盡可能清潔并且對循環(huán)空氣的干擾小。不使用時，請在顯微鏡上使用防塵罩，并將所有配件放在不透氣的容器中，避免使用腐蝕性溶劑清潔顯微鏡的任何部分，并僅使用稀釋的肥皂水清潔非光學(xué)表面。
高能熒光顯微鏡切勿以高壓力（包括鏡頭紙）在鏡頭表面上拖動任何物體，以避免在表面上引入非常細(xì)小的劃痕，使用專為光學(xué)表面設(shè)計的溶劑清潔鏡頭，或在緊急情況下使用無水乙醇清潔鏡頭。避免使用其他溶劑，因為它們可能會與玻璃上的光學(xué)涂層反應(yīng)。在用溶劑清潔之前，用壓縮氣體對鏡頭表面進行除塵，以去除松散的顆粒，用鏡頭紙擦去多余的溶劑，讓鏡頭*干燥，重復(fù)此過程。
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